Western Blot定量测试
信息概要
Western Blot定量测试是一种基于免疫印迹技术的蛋白质定量分析方法,通过电泳分离、转印、抗体孵育和信号检测等步骤,对特定蛋白质进行定性和定量分析。该检测在生物医学研究中至关重要,用于验证蛋白质表达水平、研究疾病机制、评估药物效价等,具有高特异性和灵敏度,是第三方检测机构提供的核心服务之一。
检测项目
p53蛋白,β-肌动蛋白,GAPDH蛋白,EGFR蛋白,HER2蛋白,VEGF蛋白,TNF-α蛋白,IL-6蛋白,IL-1β蛋白,IFN-γ蛋白,CDK4蛋白,Cyclin D1蛋白,Bcl-2蛋白,Bax蛋白,Caspase-3蛋白,AKT蛋白,ERK蛋白,JNK蛋白,p38 MAPK蛋白,STAT3蛋白,NF-κB蛋白,Tubulin蛋白,Actin蛋白,Vinculin蛋白,ZO-1蛋白,E-cadherin蛋白,N-cadherin蛋白,Vimentin蛋白,Snail蛋白,Twist蛋白
检测范围
激酶类蛋白质,受体类蛋白质,细胞因子类蛋白质,结构蛋白质,酶类蛋白质,转录因子类蛋白质,细胞周期蛋白类,凋亡相关蛋白类,信号转导蛋白类,细胞粘附分子类,细胞骨架蛋白类,代谢酶类,离子通道类,G蛋白偶联受体类,酪氨酸激酶受体类,丝氨酸/苏氨酸激酶类,磷酸酶类,泛素连接酶类,去泛素化酶类,甲基转移酶类,乙酰转移酶类,核受体类,膜蛋白类,胞质蛋白类,核蛋白类,分泌蛋白类,糖蛋白类,脂蛋白类,磷酸化蛋白类,糖基化蛋白类
检测方法
SDS-PAGE电泳:利用聚丙烯酰胺凝胶电泳根据蛋白质分子量进行分离。
转印操作:将凝胶中的蛋白质转移到固相膜上以便检测。
封闭处理:使用封闭剂减少膜上的非特异性结合。
一抗孵育:加入特异性一抗与目标蛋白结合。
二抗孵育:使用标记的二抗放大检测信号。
洗涤步骤:清除未结合的抗体以减少背景。
化学发光检测:通过化学发光底物产生光信号进行检测。
荧光检测:利用荧光标记抗体进行高灵敏度检测。
成像捕获:使用成像系统记录检测信号。
定量分析:通过软件分析条带强度实现定量。
半干转印法:一种快速高效的转印技术。
湿转印法:传统的转印方法,适用于各种蛋白质。
斑点印迹:直接点样检测,简化操作流程。
多色荧光Western:同时检测多个目标蛋白。
自动化Western Blot:采用自动化设备提高检测通量。
检测仪器
垂直电泳仪,半干转印仪,湿转印仪,化学发光成像系统,荧光成像系统,凝胶成像仪,微量离心机,涡旋混合器,恒温摇床,自动洗板机,酶标仪,蛋白定量仪,电泳电源,转印电源,暗箱